ПГУ-ын шинжилгээ гэж юу вэ?
Полимеразын гинжин урвал (ПГУ) шинжилгээ нь дээжинд ДНХ-ийн бага хэмжээний хэмжээг олшруулах лабораторийн арга юм. ПГУ-ын олшруулалтад ашиг сонирхлын ДНХ-ийг шинжилж, илрүүлэхэд хангалттай болтлоо дахин дахин хуулбарлана. Жишээ нь, ПГУ-ыг шээсний дээжинд байгаа заг хүйтэн эсвэл хлориди үүсгэдэг организмаас бага хэмжээний ДНХ-ийг тодорхойлоход ашиглаж болно.
ПГУ ажил?
ПГУ-ын эхний алхам нь дээжийг халаах явдал юм. Ингэснээр хоёр цтриндсон ДНХ нь хоёр дан ганц хоёр хуваагдана. Денатурац гэж нэрлэдэг. Дараа нь праймер , ДНХ-ийн дарааллын төгсгөл хүртэлх ДНХ-ийн богино дээжийг Дээж ДНХ-тэй хослуулдаг. Үүний дараа ДНХ полимераза нь праймерын байршлын ДНХ-ийн хуулбарыг эхлүүлэхэд хэрэглэгддэг. Эцэст нь хэлэхэд, ДНХ нь дахин холбоосыг салгахын тулд халааж, ПГУ-ын бүх ажиллагаа дахин эхэлнэ.
Дээжин дэх сонирхлын ДНХ-ийн сегментийн хэмжээ нь ПГУ-ын цикл тутамд экспоненци нэмэгддэг: нэг хувь нь хоёр болж, дараа нь дөрөв болж, дараа нь найман болдог; Иймээс ерөнхийдөө 20-иос доошхи мөчлөгүүд нь тухайн ДНК байгаа эсэхийг тодорхойлох (хэрэв байгаа бол, шинжилгээнд хангалттай дээж авах боломжтой) эсэхийг тодорхойлох хэрэгтэй.
Полимеразын хэлхээний урвалын бүх үе шатууд нь ДНХ-ийг боловсруулж, праймеруудыг хэрэглэж, ДНХ-ийг урт хугацаанд өөр өөр температурт гүйцэтгэх бөгөөд эхний хольцыг нэгтгэсний дараа үе шатуудыг термопластик , Температур нь шаардлагатай түвшинд явагдаж буй үе бүрт хангалттай хугацаагаар явагддаг.
Тиймээс ПГУ нь хүний оролцооны шаардлага бага шаарддаг ганц сорилтын хоолойд зорилтот ДНХ-ийн хэмжээг нэмэгдүүлэх үр ашигтай арга юм.
Полимераза гинжин урвал нь анх 1980-аад оны эхээр боловсруулсан биологийн аргын хувьсгалыг төлөөлж, PCR-ийн бүтээгч Кари Муллис 1993 онд химийн чиглэлээр Нобелийн шагнал хүртсэн.
ПГУ-ын шинжилгээ хийлгэхэд яагаад хамааралтай вэ?
Полимераза гинжин урвал ба шүлтийн гинжин урвал зэрэг холбогдох аргууд нь БЗДХ-ын шинжилгээ хийхэд чухал ач холбогдолтой болохыг нотолж байна. Учир нь эдгээр арга нь вирусын ДНХ эсвэл РНХ-ийг дээжинд шууд тодорхойлох боломжтой байдаг. Эмгэг төрүүлэгчийн генетик кодыг тодорхойлох нь эмгэг төрүүлэгчийг амьд үлдэхийг шаарддаггүй бактерийн өсгөвөр эсвэл вирусийн соёл шиг. Түүнээс гадна хүмүүс удаан хугацааны туршид халдварын эсрэг хариу үйлдлийн эсрэг хариу урвалыг ( ELISA илрүүлэх гэх мэт) илрүүлэхийг шаарддаггүй. Энэ нь ПГУ-ын арга техник заримдаа эрт үеийн өвчнүүдийг илрүүлж, дээжийг амьдаар нь эсвэл тестийг зөв цагт байлгах талаар санаа тавих хэрэгтэй.